| 细胞技术服务

在细胞生物学领域,高超的细胞实验技术是能解决一系列未知问题的理想工具。试界医学能够提供多种细胞技术服务,包括细胞培养、原代细胞分离培养、稳定细胞株构建、病毒培养分离、病毒拯救毒力测定等服务。此外,我们还能够提供多种细胞检测服务,包括细胞增殖检测服务、细胞周期检测服务、细胞凋亡检测服务、细胞迁移与侵袭检测服务、细胞自噬检测等。以下是一些常见的细胞技术类型:


1、细胞培养技术:包括原代细胞培养、细胞株培养、细胞凋亡研究、基因工程细胞培养等。

2、细胞转染技术:包括质粒转染、病毒载体转染等,用于向细胞内导入外源DNA、RNA、蛋白质等物质。

3、细胞融合技术:包括细胞间融合、细胞与病毒融合、细胞与基因工程构建的载体融合等,用于产生杂交细胞或基因重组体。

4、细胞标记技术:包括荧光标记、酶标记、同位素标记等,用于跟踪和定量分析细胞内的分子或结构。

5、细胞分离和分选技术:包括流式细胞术、磁性细胞分选等,用于分离和纯化特定种类的细胞或细胞亚群。

6、细胞生物学成像技术:包括荧光显微镜、电子显微镜、原子力显微镜等,用于细胞结构、功能和代谢过程进行高分辨率的观察和记录。

7、细胞治疗技术:包括干细胞治疗、基因治疗等,利用细胞工程技术进行疾病治疗和再生医学研究。

细胞活性氧(ROS)检测

利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧的检测。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF,检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。


| 实验流程 


Step1:制成单细胞悬液(组织样本)

Step2:溶血(细胞样本无需进行此步骤)

Step3:离心去上清

Step4:调整细胞密度

Step5:加入相应的荧光探针

Step6:孵育

Step7:洗涤后离心去上清

Step8:上机检测


| 实验费用 :根据客户检测需求以及实验复杂程度进行报价


| 客户注意事项 


1.标本收集与保存

>> 组织样品:新鲜组织放入液氮或-70度保存,组织不少于100mg(约绿豆大小);

>> 培养细胞:通过细胞计数取不少于2000000个细胞于EP管,加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂,混匀后保存于冰箱(-70℃,避免反复冻融);

>> 血液细胞标本:以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂,保存(-70℃可长期保存,避免反复冻融);

>> 血清或细胞培养液标本:离心去掉杂质后取上清入EP管,保存(以上4℃可保存15-20天,-70℃可长期保存,避免反复冻融)。


2.样本运输:可选以下任何的一种方式寄送标本

>> 组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后加冰袋运输;

>> 细胞样本也可以直接快件寄送培养瓶(密封保证不污染,培养液不漏出,细胞不要长得太满,50%左右,灌满培养液);

>> 血清或上清液直接加冰袋寄送(密封保证液体不漏出,视路途远近2-3天可到达)。


| 送检与交付标准 


样品类型 样品需求 运输条件

组织 离体后组织制成单细胞悬液,加入PBS培养基内 常温运输

活细胞 样本量:1*106个细胞/TEST,加入PBS培养基内 常温运输

血液 将血液采集在EDTA肝素钠的抗凝采血管内 常温运输

细胞划痕实验

细胞划痕实验 (Wound Healing)是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。


| 细胞划痕实验特点 


1、在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。

2、非常适合研究细胞与胞外基质(ECM),细胞与细胞之间相互作用引起的细胞迁移。

3、与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容,可用于分析细胞间的相互作用。

4、研究细胞迁移的体外实验中最简单的方法。


| 细胞划痕实验流程 


细胞接种 → 细胞划痕 → 细胞迁移期间图像拍照 → 数据处理

细胞增殖与活性检测

细胞增殖与活性检测服务是直接测定DNA的合成,同时也是测定物质毒性、评估药物安全、细胞健康的基本方法。通过检测细胞增殖活性,可以指示肿瘤细胞增殖活性、目的基因瞬转/稳转细胞系的细胞增殖活性,在小分子化合物/多肽等药物筛选及功能安全性研究、中药/中间体等药物筛选及功能安全性研究、目的基因过表达的基因功能研究、目的基因RNAi干扰的基因功能研究中发挥重要作用。细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖,通过分裂,可以将复制的遗传物质,平均地分配到两个子细胞中去,是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。


目前细胞增殖检测主要分为五类:DNA合成检测、代谢活性检测、细胞数量检测、细胞增殖相关抗原检测和ATP浓度检测。直接测定DNA的合成是细胞增殖检测最准确方法之一,同时也是测定物质毒性、评估药物安全、细胞健康的基本方法,就是通过检测细胞增殖活性,可以指示肿瘤细胞增殖活性、目的基因瞬转/稳转细胞系的细胞增殖活性,在小分子化合物/多肽等药物筛选及功能安全性研究、中药/中间体等药物筛选及功能安全性研究、目的基因过表达的基因功能研究、目的基因RNAi干扰的基因功能研究中发挥重要作用。


细胞增殖与活性检测实验流程

细胞样品 → 细胞培养 → 根据客户需求进行细胞处理 → 加入CCK8孵育 → 酶标仪检测吸光度值 → 数据分析

细胞STR鉴定

STR是以核心序列 (core repeat units) 首尾相连多次重复形成。每个STR的核心序列结构相同,长度为2-6bp,但其重复单位数目和重复区域的长度不同,因此STR在不同种族、不同人群之间的分布具有很大差异性,构成了STR遗传多态性。


细胞STR鉴定分析法已经成为一种重要的鉴定分析方法,广泛应用于法医学、亲子鉴定及细胞鉴定等领域。近年来,大量研究表明STR基因分型方法是进行细胞交叉污染和性质鉴定的最有效和准确的方法之一,STR基因分型应用于细胞鉴定已被ATCC等机构强烈推荐。


| 细胞STR鉴定服务项目 


1、人类细胞20个基因座检测

目前基因座最多的检测服务,所选用的基因座不仅包含ATCC和JCRB细胞库中的基因座,更添加11个高度多态性位点,可方便与权威数据库进行比对,具有极高的准确性。位点如下:


2、小鼠细胞检测

依据美国国家标准技术研究所NIST 和ATCC 建议的9个四碱基重复位点:18-3、9-2、6-7、5-5、X-1、15-3、12-1、6-4、4-2和Jarid1。并额外添加人源位点CSF1PO和vWA,用于鉴定人鼠细胞交叉污染。

3、人鼠细胞交叉污染检测

采用人鼠复合扩增体系检测人类细胞中的小鼠细胞污染,主要应用在干细胞研究领域。同时可以用于判断人鼠细胞混淆的情况。

4、支原体检测

在细胞培养过程中,支原体感染的情况常有发生。当细胞(特别是传代细胞)被支原体污染后,细胞内的DNA、RNA及蛋白表达会发生改变,而细胞的生长率通常并未发生显著的影响,因此细胞被支原体污染一般难以察觉。细胞增殖与活性检测服务是直接测定DNA的合成,同时也是测定物质毒性、评估药物安全、细胞健康的基本方法。通过检测细胞增殖活性,可以指示肿瘤细胞增殖活性、目的基因瞬转/稳转细胞系的细胞增殖活性,在小分子化合物/多肽等药物筛选及功能安全性研究、中药/中间体等药物筛选及功能安全性研究、目的基因过表达的基因功能研究、目的基因RNAi干扰的基因功能研究中发挥重要作用。细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖,通过分裂,可以将复制的遗传物质,平均地分配到两个子细胞中去,是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。


目前细胞增殖检测主要分为五类:DNA合成检测、代谢活性检测、细胞数量检测、细胞增殖相关抗原检测和ATP浓度检测。直接测定DNA的合成是细胞增殖检测最准确方法之一,同时也是测定物质毒性、评估药物安全、细胞健康的基本方法,就是通过检测细胞增殖活性,可以指示肿瘤细胞增殖活性、目的基因瞬转/稳转细胞系的细胞增殖活性,在小分子化合物/多肽等药物筛选及功能安全性研究、中药/中间体等药物筛选及功能安全性研究、目的基因过表达的基因功能研究、目的基因RNAi干扰的基因功能研究中发挥重要作用。


细胞增殖与活性检测实验流程

细胞样品 → 细胞培养 → 根据客户需求进行细胞处理 → 加入CCK8孵育 → 酶标仪检测吸光度值 → 数据分析细胞划痕实验 (Wound Healing)是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。


| 细胞划痕实验特点 


1、在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。

2、非常适合研究细胞与胞外基质(ECM),细胞与细胞之间相互作用引起的细胞迁移。

3、与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容,可用于分析细胞间的相互作用。

4、研究细胞迁移的体外实验中最简单的方法。


| 细胞划痕实验流程 


细胞接种 → 细胞划痕 → 细胞迁移期间图像拍照 → 数据处理利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧的检测。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF,检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。


| 实验流程 


Step1:制成单细胞悬液(组织样本)

Step2:溶血(细胞样本无需进行此步骤)

Step3:离心去上清

Step4:调整细胞密度

Step5:加入相应的荧光探针

Step6:孵育

Step7:洗涤后离心去上清

Step8:上机检测


| 实验费用 :根据客户检测需求以及实验复杂程度进行报价


| 客户注意事项 


1.标本收集与保存

>> 组织样品:新鲜组织放入液氮或-70度保存,组织不少于100mg(约绿豆大小);

>> 培养细胞:通过细胞计数取不少于2000000个细胞于EP管,加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂,混匀后保存于冰箱(-70℃,避免反复冻融);

>> 血液细胞标本:以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂,保存(-70℃可长期保存,避免反复冻融);

>> 血清或细胞培养液标本:离心去掉杂质后取上清入EP管,保存(以上4℃可保存15-20天,-70℃可长期保存,避免反复冻融)。


2.样本运输:可选以下任何的一种方式寄送标本

>> 组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后加冰袋运输;

>> 细胞样本也可以直接快件寄送培养瓶(密封保证不污染,培养液不漏出,细胞不要长得太满,50%左右,灌满培养液);

>> 血清或上清液直接加冰袋寄送(密封保证液体不漏出,视路途远近2-3天可到达)。


| 送检与交付标准 


样品类型 样品需求 运输条件

组织 离体后组织制成单细胞悬液,加入PBS培养基内 常温运输

活细胞 样本量:1*106个细胞/TEST,加入PBS培养基内 常温运输

血液 将血液采集在EDTA肝素钠的抗凝采血管内 常温运输STR是以核心序列 (core repeat units) 首尾相连多次重复形成。每个STR的核心序列结构相同,长度为2-6bp,但其重复单位数目和重复区域的长度不同,因此STR在不同种族、不同人群之间的分布具有很大差异性,构成了STR遗传多态性。

细胞STR鉴定分析法已经成为一种重要的鉴定分析方法,广泛应用于法医学、亲子鉴定及细胞鉴定等领域。近年来,大量研究表明STR基因分型方法是进行细胞交叉污染和性质鉴定的最有效和准确的方法之一,STR基因分型应用于细胞鉴定已被ATCC等机构强烈推荐。


| 细胞STR鉴定服务项目 


1、人类细胞20个基因座检测

目前基因座最多的检测服务,所选用的基因座不仅包含ATCC和JCRB细胞库中的基因座,更添加11个高度多态性位点,可方便与权威数据库进行比对,具有极高的准确性。位点如下:



2、小鼠细胞检测

依据美国国家标准技术研究所NIST 和ATCC 建议的9个四碱基重复位点:18-3、9-2、6-7、5-5、X-1、15-3、12-1、6-4、4-2和Jarid1。并额外添加人源位点CSF1PO和vWA,用于鉴定人鼠细胞交叉污染。


3、人鼠细胞交叉污染检测

采用人鼠复合扩增体系检测人类细胞中的小鼠细胞污染,主要应用在干细胞研究领域。同时可以用于判断人鼠细胞混淆的情况。


4、支原体检测

在细胞培养过程中,支原体感染的情况常有发生。当细胞(特别是传代细胞)被支原体污染后,细胞内的DNA、RNA及蛋白表达会发生改变,而细胞的生长率通常并未发生显著的影响,因此细胞被支原体污染一般难以察觉。

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王老师